Молекулярно-генетическое типирование энтеробактерий с продукцией БЛРС, выделенных от больных гемобластозами

Цель исследования - определить основные механизмы инфицирования энтеробактериями с продукцией бета-лактамаз расширенного спектра (БЛРС) у гематологических больных. Материал и методы. В проспективное исследование (2013-2015 гг.) были включены случаи бактериемии, вызванные энтеробактериями. Мазки со слизистой оболочки прямой кишки брали в течение первых трёх суток после получения гемокультуры. Для детекции БЛРС были использованы фенотипические методы. Гены резистентности групп bla_TEM, bla_SHV и bla_CTX-M определяли методом ПЦР. Генотипирование проводили методом ERIC-ПЦР. Результаты. В 89 случаях бактериемии был выделен 91 изолят энтеробактерий (56% - E.coli, 26% - K.pneumoniae, 18% - другие) у 82 больных (медиана возраста 50 лет). Продукция БЛРС была у 19 (21%) изолятов (E.coli - n=11, K.pneumoniae - n=8). Бета-лактамазы CTX-M типа были определены у 95% изолятов. Колонизация слизистой оболочки прямой кишки, идентичными по виду энтеробактериями с продукцией БЛРС, была во всех 19 случаях бактериемии, вызванной БЛРС положительными энтеробактериями, и только в 8 (11%) из 72 при выделении из гемокультуры энтеробактерий без продукции БЛРС (p<0,0001). Генотипирование 19 продуцентов БЛРС из гемокультуры выявило генетическую идентичность только у двух изолятов E.coli, выделенных от одного пациента с интервалом в два месяца. При попарном генотипировании продуцентов БЛРС, выделенных из гемокультуры и со слизистой прямой кишки, генетически родственными были 26% пар изолятов. Заключение. У больных с опухолями системы крови и бактериемией, вызванной энтеробактериями с продукцией БЛРС, преобладает эндогенный путь инфицирования.

Enterobacteriaceae, БЛРС , CTX-M, бактериемия, колонизация, генотипирование, Enterobacteriaceae , ESBL , CTX-M , bacteremia , colonization , genotyping

1. Mikulska M., Viscoli C., Orasch C., Livermore D.M., Averbuch D., Cordonnier C. et al. Aetiology and resistance in bacteraemias among adult and paediatric haematology and cancer patients. J Infect 2014; 68 (4): 321-331.

2. Клясова Г.А. Инфекции при гемобластозах и депрессиях кроветворения: клиника, диагностика и лечение: Автореф. дисс.. д-ра мед. наук. М.: 2009.

3. Guyot K., Biran V., Doit C., Moissenet D., Guillard T., Brasme L. et al. Raman spectroscopic analysis of the clonal and horizontal spread of CTX-M-15-producing Klebsiella pneumoniae in a neonatal intensive care unit. Eur J Clin Microbiol Infect Dis 2012; 31: 2827-2834.

4. Paniara O, Platsouka E., Dimopoulou H., Tzelepi E., Miriagou V., Tzouvelekis L.S. Diversity of beta-lactam resistance levels among related Klebsiella pneumoniae strains isolated in an intensive care unit. J Chemother 2000; 12 (3): 204-207.

5. Giraud-Morin C., Fosse T. A seven-year survey of Klebsiella pneumoniae producing TEM-24 extended-spectrum beta-lactamase in Nice University Hospital (1994-2000). J Hosp Infect 2003; 54 (1): 25-31.

6. Marcade G., Brisse S., Bialek S., Marcon E., Leflon-Guibout V., Passet V. et al. The emergence of multidrug-resistant Klebsiella pneumoniae of international clones ST13, ST16, ST35, ST48 and ST101 in a teaching hospital in the Paris region. Epidemiol Infect 2013; 141 (8): 1705-1712.

7. Baquero F., Coque T.M., Canton R. Allodemics. Lancet Infect Dis 2002; 2 (10): 591-592.

8. Определение чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам (Методические указания МУК 4.21890-04). Клин микробиол антимикроб химиотер 2004; 6: 306-359.

9. Versalovic J., Koeuth T., Lupski J.R. Distribution of repetitive DNA sequences in eubacteria and application to fingerprinting of bacterial genomes. Nucleic Acids Res 1991; 19 (24): 6823-6831.

10. Biehl L.M., Schmidt-Hieber M., Liss B., Cornely O.A., Vehreschild M.J. Colonization and infection with extended spectrum beta-lactamase producing Enterobacteriaceae in high-risk patients - Review of the literature from a clinical perspective. Crit Rev Microbiol 2016; 42 (1): 1-16.

11. Ben-Ami R., Schwaber M.J., Navon-Venezia S., Schwartz D., Giladi M., Chmelnitsky I. et al. Influx of extended-spectrum beta-lactamase-producing enterobacteriaceae into the hospital. Clin Infect Dis. 2006; 42 (7): 925-934.

12. Liss B.J., Vehreschild J.J., Cornely O.A., Hallek M., Fätkenheuer G., Wisplinghoff H. et al. Intestinal colonisation and blood stream infections due to vancomycin-resistant enterococci (VRE) and extended-spectrum beta-lactamase-producing Enterobacteriaceae (ESBLE) in patients with haematological and oncological malignancies. Infection 2012; 40 (6): 613-619.

13. Охмат В.А., Клясова Г.А., Коробова А.Г., Паровичникова E.H., Федорова А.В., Троицкая В.В. и соавт. Следует ли назначать карбапенемы всем больным с фебрильной нейтропенией и колонизацией энтеробактериями с продукцией ß-лактамаз расширенного спектра? Онкогематология 2016;11(3): 49-57

14. Averbuch D., Orasch C., Cordonnier C., Livermore D.M., Mikulska M., Viscoli C. et al. European guidelines for empirical antibacterial therapy for febrile neutropenic patients in the era of growing resistance: summary of the 2011 4th European Conference on Infections in Leukemia. Haematologica 2013; 98 (12): 1826-1835

15. Calbo E., Garau J. The changing epidemiology of hospital outbreaks due to ESBL-producing Klebsiella pneumoniae: the CTX-M-15 type consolidation. Future Microbiol 2015; 10 (6): 1063-1075.

16. Сидоренко С.В., Тишков В.И. Молекулярные основы резистентности к антибиотикам. Успехи биол хим 2004; 44: 263-306.

17. Эйделъштейн М.В., Страчунский Л.С. Динамика распространенности и чувствительности БЛРС-продуцирующих штаммов энтеробактерий к различным антимикробным препаратам в ОРИТ Росии. Клин микробиол антимикроб химиотер 2005; 7 (4): 323-336

18. Livermore D.M., Canton R., Gniadkowski M., Nordmann P., Rossolini G.M., Arlet G. et al. CTX-M: changing the face of ESBLs in Europe. J Antimicrob Chemother 2007; 59 (2): 165-174.

19. Клясова Г.А., Бриллиантова A.H., Миронова А.В. Генотипирование грамотрицательных бактерий, выделенных из крови при сепсисе у больных с гематологическими заболеваниями. Тер архив 2007; 79 (7): 74-80

20. Gudiol C., Calatayud L., Garcia-Vidal C., Lora-Tamayo J., Cisnal M., Duarte R. et al. Bacteraemia due to extended-spectrum beta-lactamase-producing Escherichia coli (ESBL-EC) in cancer patients: clinical features, risk factors, molecular epidemiology and outcome. J Antimicrob Chemother 2010; 65 (2): 333-341.

21. Cuartero C., Sanchez Diaz A.M., Ruiz-Garbajosa P., Valverde A., Alonso J.M., Rodriguez J.D. et al. Dynamics of intestinal colonization with extendedspectrum beta-lactamases (ESBL)-producing Enterobacteriaceae in neutropenic oncohaematological patients. P2132 In: Bacterial infections in cancer patients. Proceeding of 23th European Congress of Clinical Microbriology and Infectious Diseases, 2013 Apr 27-30; Berlin, Germany. Available from: https://www.escmid.org/escmid_publications/escmid_eli-brary/?q=Cuartero+C.&id=2173&L=0&x=27&y=18

22. Thom K.A., Hsiao W.W., Harris A.D., Stine O.C., Rasko D.A,. Johnson J.K. Patients with Acinetobacter baumannii bloodstream infections are colonized in the gastrointestinal tract with identical strains. Am J Infect Control 2010; 38 (9): 751-753.

23. Samet A., Sledzinska A., Krawczyk B., Hellmann A., Nowicki S., Kur J. et al. Leukemia and risk of recurrent Escherichia coli bacteremia: genotyping implicates E.coli translocation from the colon to the bloodstream. Eur J Clin Microbiol Infect Dis 2013; 32 (11): 1393-1400.

24. Krawczyk B., Sledzinska A., Szemiako K., Samet A., Nowicki B., Kur J. Characterisation of Escherichia coli isolates from the blood of haematological adult patients with bacteraemia: translocation from gut to blood requires the cooperation of multiple virulence factors. Eur J Clin Microbiol Infect Dis 2015; 34 (6): 1135-1143.